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板蓝根多糖IIP-A-1和IIP-2作为疫苗佐剂的免疫原性

作者:李海霞 刘坤璐 贾培媛 于卫立 武军华 胡涛 王勃 王玉霞 单俊杰

关键词: 板蓝根; 多糖; 佐剂; 抗体;

摘要:目的研究板蓝根中均一多糖IIP-A-1和IIP-2作为疫苗佐剂的免疫原性。方法 (1)分别用钥孔血蓝蛋白(KLH)和牛血清白蛋白(BSA)为载体蛋白,与IIP-A-1和IIP-2分别偶联,制备免疫抗原KLH-IIP-A-1和KLH-IIP-2及检测抗原BSA-IIP-A-1和BSA-IIP-2。KLH-IIP-A-1和KLH-IIP-2(每只家兔300μg)分别与弗氏佐剂(每只0.65 mL)联用,皮内注射免疫家兔2次,间隔28 d;第2次免疫后14 d,分别用KLH,BSA和BSA-IIP-A-1或BSA-IIP-2 5 mg·L-1包被酶联反应板,ELISA检测家兔血清中抗IIP-A-1和IIP-2抗体。(2)IIP-A-1和IIP-2(每只500μg)分别im免疫小鼠3次,每次间隔28 d;每次免疫后14 d,用BSA-IIP-A-1或BSA-IIP-2 5 mg·L-1包被酶联反应板,ELISA检测小鼠血清中抗IIP-A-1或IIP-2抗体。(3)IIP-A-1和IIP-2为佐剂(每只200μg),分别配伍口蹄疫病毒灭活疫苗(Aftosa,每只2μg)im免疫小鼠2次;IIP-2(每只200μg)配伍H1N1病毒裂解疫苗(每只3μg)im免疫3次,配伍乙肝病毒重组亚单位蛋白乙肝病毒表面抗原(HBsAg,每只2μg)im免疫小鼠2次;每次间隔28 d。末次免疫后14 d,用KLH-IIP-A-1或KLH-IIP-2 2 mg·L-1包被酶联反应板,ELISA检测小鼠血清中抗IIP-A-1或IIP-2抗体。结果 (1)KLH-IIP-A-1和KLH-IIP-2分别与弗氏佐剂联用免疫家兔2次,可产生抗KLH,IIP-A-1或IIP-2抗体,抗KLH滴度≥1∶50 000,抗IIP-A-1抗体滴度≥1∶20 000,抗IIP-2抗体滴度≥1∶100 000。(2)IIP-A-1和IIP-2分别单独肌注免疫小鼠3次,仅检测出抗IIP-2 IgG1抗体,滴度为1∶1000。(3)IIP-A-1作为佐剂配伍Aftosa疫苗免疫小鼠后,未检测出抗IIP-A-1 IgG1抗体。IIP-2作为佐剂分别配伍H1N1和Aftosa疫苗免疫小鼠后,均可检测出抗IIP-2 IgG1抗体,滴度均为1∶400;配伍HBsAg抗原免疫小鼠后,检测出低水平的抗IIP-2 IgG1抗体,滴度为1∶100。结论作为半抗原,板蓝根多糖IIP-A-1和IIP-2连接KLH后,可刺激家兔产生高滴度的抗IIP-A-1和IIP-2抗体。作为佐剂,IIP-A-1无免疫原性;IIP-2具有一定的免疫原性,分别与Aftosa疫苗、H1N1病毒裂解疫苗和HbsAg配伍免疫小鼠,均产生抗IIP-2 IgG1型抗体。


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