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1 《中国药理学与毒理学杂志》为军事医学科学院毒物药物研究所、中国药 理学会和中国毒理学会共同主办的学术性刊物，双月刊，国内外公开发行。编辑部设在军事医学科学院毒物药物研究所。本刊是中国中文核心期刊
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白藜芦醇抑制蛋白激酶B磷酸化缓解大鼠肌成纤维细胞形成及肾纤维化
作者:林周豪 白永恒 陆红 郭勇 吴存造
关键词: 白藜芦醇; 肌成纤维细胞; 肾纤维化; 蛋白激酶B磷酸化;
摘要：目的探讨白藜芦醇对大鼠肌成纤维细胞形成及肾纤维化的影响。方法制备大鼠单侧输尿管梗阻（UUO）模型,白藜芦醇干预组于手术当天ig给予白藜芦醇20 mg·kg-1,术后第7天取其梗阻侧肾脏进行检测。HE和Masson染色分别观察肾组织病理改变和纤维化程度;免疫组织化学染色检测肌成纤维细胞标志物α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达。体外分别培养肾小管上皮细胞（NRK-52E）和成纤维细胞（NRK-49F）,各分为3组:细胞对照组,转化生长因子β1（TGF-β1）5μg·L-1诱导组和TGF-β15μg·L-1+白藜芦醇10或100 mmol·L-1干预组。细胞免疫荧光染色检测α-SMA、细胞外基质成分（Ⅲ型胶原）和上皮细胞标志物E-钙黏着蛋白的表达;Western蛋白印迹法检测细胞或组织中蛋白激酶B（AKT）磷酸化。结果与假手术组相比,HE染色显示UUO模型组肾间充质面积扩大（P<0.01）,Masson染色显示UUO模型组胶原累积明显（P<0.05）;白藜芦醇干预组上述改变均被抑制（P<0.05）,α-SMA阳性肌成纤维细胞的形成亦被抑制（P<0.05）。体外应用TGF-β1刺激后,与细胞对照组相比,TGF-β15μg·L-1诱导组α-SMA表达增加（P<0.01）,提示细胞表型转化为肌成纤维细胞数量明显增加,同时伴随着Ⅲ型胶原过度累积（P<0.01）;白藜芦醇干预组上述改变被抑制（P<0.05）。进一步研究发现,在肌成纤维细胞产生过程中,AKT磷酸化水平增加（P<0.05）;白藜芦醇干预后,体内外AKT磷酸化升高均被抑制（P<0.01）。结论白藜芦醇可能通过拮抗AKT的磷酸化,抑制TGF-β1所诱导的NRK-52E和NRK-49F表型转化为肌成纤维细胞,进而减少基质累积,缓解肾纤维化。
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